【实验前准备】
1. 适用仪器
最大离心力可达 1200g 的水平转子离心机
2. 抗凝剂的选择
在动物实验采血时,很多实验者选择医用真空采血管获得抗凝血,医用采血管中的抗凝剂只考虑血浆质量,但不利于高纯度细胞分离实验 (或必须使用枸橼酸钠的医用真空抗凝采血管)。
pythonbio公司的抗凝剂(100ml/200ml/500ml)及抗凝管(5ml)专用于细胞分离,改变使用普通采血管获得抗凝血分离效果不佳,提取率及纯度低下的不良结果。
3.无菌硅化离心管(少量血液样本专用离心管)
4.PBMC 最佳分离时间
血液离体后 2 小时内。如达不到 2 小时内分血条件,请务必于 4 小时内进行分血步骤,
超过 4 小时很难顺利进行分离。
血液离体时间 分离效果
2 小时内 最佳
2-4 小时 可接受
4-6 小时 细胞活性下降,分离效果不佳
6 小时以上 分离效果极差,直至分离不出细胞
5. 分离液的使用环境
a. 分离液需常温(37℃-15℃)避光保存,严禁冷藏冷冻保存;
b. 使用时严格遵守无菌操作规范(超净工作台或生物安全柜内),并在 18℃-22℃环境温
度下进行操作,20℃条件下分离效果最佳。超出此温度范围,有可能使分离液密度发生
改变,造成分离效果不佳。
6. 参考值(目的细胞参考范围)
本试剂盒可保证目的细胞的提取率大于 80%,不是纯度。如需获得高纯度目的细胞,
请配合免疫磁珠分选。本试剂盒可减少磁珠的使用量,减少成本。